بروتين SweAgarose A/G، جسم مضاد Agarose منقى

البروتين أ هو بروتين سطح جدار الخلية الموجود فيالمكورات العنقودية الذهبيةبوزن جزيئي 42 كيلو دالتون. البروتين G هو بروتين مرتبط بالجلوبيولين المناعي ويعبر عنهالبكتيريا العقدية(C أو G). البروتين A والبروتين G متشابهان وظيفيًا ويمكنهما الارتباط بشكل خاص بالجلوبيولين المناعي للثدييات (Ig). يمكن استخدام البروتين المؤتلف A وG مع التعديلات المناسبة المرتبطة بالاغاروز في الترسيب المناعي أو تنقية الأجسام المضادة. بروتين agarose مناسب للترسيب المناعي لـ IgG1، IgG2، IgG4، الماوس IgG2a، IgG2b، بينما البروتين G agarose مناسب للترسيب المناعي لـ IgG1، IgG2، IgG3، IgG4، الماوس IgG1، IgG2a، IgG2b، IgG3، الفئران IgG1، IgG2a، الأجسام المضادة متعددة النسيلة IgG2b وIgG2c. (انظر الجدول الأول للحصول على معلومات محددة)

يعتمد هذا المنتج بروتين A/G المسمى agarose الذي تم تطويره وإنتاجه ذاتيًا، مقارنة بالمنتجات المماثلة في السوق، ويربط هذا المنتج الأجسام المضادة بشكل أكثر كفاءة وله معدل ربط غير محدد أقل، جنبًا إلى جنب مع المخزن المؤقت الأمثل، يمكن أن يكون مناسبًا وفعالة لتجارب الهطول المناعي؛ يمكن استخدامه على نطاق واسع في عزل وتنقية البروتينات المستهدفة في عينات مثل ليساتيس الخلية، طاف الإفراز الخلوي، المصل، الاستسقاء، إلخ.

السفينة مع الجليد الرطب؛ يُخزن في درجة 2-8، صالح لمدة 12 شهرًا.

تشير تركيبات الكاشف المتعلقة بتنقية الأجسام المضادة إلى ما يلي، ويمكن تعديل المستخدم وفقًا لظروف تجريبية محددة.

الإجراء اليدوي (تنقية استسقاء الفأر IgG كمثال)

1. معالجة العينات:خذ 500 ميكرولتر من عينة الاستسقاء، وأضف محلول الغسيل الملزم لتعويض 500 ميكرولتر، إذا كان هناك المزيد من رواسب البروتين في العينة، قم بالطرد المركزي للطاف للتجارب، مما يمكن أن يحسن نقاء الجسم المضاد.

2. المعالجة الاغاروز:قم بتدوير الجسم المضاد agarose المنقى لمدة 30 ثانية لإعادة التعليق بشكل كافٍ، خذ 100 ميكرولتر من 50% (v/v) بروتين SweAgarose Protein A/G الأجسام المضادة agarose المنقى في أنبوب 1.5 مل EP جديد آخر، جهاز طرد مركزي عند 6،000 xg لـ 30 ثانية عند 4 درجات وتخلص من المادة الطافية، واغسلها بـ 1 مل من محلول الغسيل الرابط مرتين، ومن ثم أخذ المادة طافية بعد الشفط مغناطيسيا.

ملحوظة:يمكن تعديل كمية الاغاروز وفقا لكمية الأجسام المضادة في العينة.

3. امتصاص الأجسام المضادة:أضف العينة المعالجة في الخطوة 1 إلى الاغاروز في الخطوة 2، ودوّمها واخلطها جيدًا، ثم ضع أنبوب EP في خلاط دوار أو أدر الأنبوب يدويًا بلطف في درجة حرارة الغرفة (حوالي 25 درجة) لجعل الاغاروز على اتصال كامل بالعينة ، اقلبه لمدة 15 دقيقة، جهاز الطرد المركزي عند 6,000 xg لمدة 30 ثانية عند 4 درجة، ثم تخلص من المادة الطافية.

4. غسل الاغاروز :أضف 1 مل من المخزن المؤقت للغسيل الملزم إلى أنبوب EP، وأعد التعليق بالاهتزاز ثم جهاز الطرد المركزي عند 6,000 xg لمدة 30 ثانية عند 4 درجات. تجاهل المادة طافية وكرر العملية 3 مرات.

5. شطف الأجسام المضادة:أضف {{0}}.5~1.0 مل من الشاطف إلى أنابيب EP مع الاغاروز المغسول كما هو موضح أعلاه، وأعد تعليق الأنابيب بسرعة عن طريق الأنابيب أو الدوامة، ثم اقلب الأنابيب بلطف في خلاط دوران أو يدويًا في درجة حرارة الغرفة (حوالي 25 درجة)، جهاز طرد مركزي عند 6,000 xg لمدة 30 ثانية عند 4 درجات بعد التقليب لمدة 10 دقائق، وبعد ذلك جمع المادة طافية في أنابيب EP جديدة.

6. تحييد الأجسام المضادة:أضف كمية معينة من محلول التعادل إلى شطافة الجسم المضاد في الخطوة 5، بشكل عام 1/10 من حجم شطف الجسم المضاد (على سبيل المثال، إذا كانت شطافة الجسم المضاد 500 ميكرولتر، فإن كمية محلول التعادل المضافة هي 50 ميكرولتر)، بحيث يكون الرقم الهيدروجيني يتم الحفاظ على قيمة الجسم المضاد المُزال في بيئة محايدة، مما يساعد على الحفاظ على النشاط البيولوجي للجسم المضاد وتجنب تعطيل نشاط الجسم المضاد.

7. ما بعد العلاج من الاغاروز:اغسل الاغاروز مرتين بمحلول الشطف بعد الاستخدام، جهاز الطرد المركزي عند 6، 000 xg لمدة 30 ثانية عند 4 درجة، وتجاهل المادة طافية؛ ثم اغسل ثلاث مرات بمحلول الغسيل الملزم، جهاز الطرد المركزي عند 6، 000 xg لمدة 30 ثانية عند 4 درجات، وتخلص من المادة الطافية؛ أعد تعليق الاغاروز مع 200 ميكرولتر من محلول الحفظ، ثم قم بتخزينه في درجة حرارة 2 ~ 8 درجة.

1. يرجى قراءة هذه التعليمات بعناية قبل الشروع في تنقية الأجسام المضادة.

2. لا تجميد أو الطرد المركزي في الاغاروز لأن هذا قد يسبب تجميع لا رجعة فيه من الاغاروز.

الجدول 1

للاستخدام البحثي فقط. ليس للاستخدام في الإجراءات التشخيصية أو العلاجية!

الوسم : بروتين سويجاروز a/g جسم مضاد agarose منقى، الصين بروتين سويجاروز a/g جسم مضاد agarose منقى المصنعين والموردين والمصنع