مقدمة المنتج
|
اسم المنتج |
قطة. لا. |
المواصفات. |
|
مجموعة استخراج الحمض النووي الجينومي البكتيري من MagBind |
G3603-50T |
50 T |
الوصف/المقدمة
يمكن لمجموعة MagBind Bacterial Genomic DNA Extraction إطلاق الحمض النووي الجينومي البكتيري بسرعة من خلال نظام المخزن المؤقت للتحلل البكتيري المُحسّن خصيصًا. بالاشتراك مع الخرز المغناطيسي الفائق المغناطيسية، والتي تم تطويرها خصيصًا لاستخراج الحمض النووي من قبل شركتنا، يتم امتصاص الحمض النووي الجينومي في المحللة بشكل انتقائي تحت تأثير محلول الربط، وتتم إزالة الكمية الصغيرة من الشوائب التي تمتزها الخرزات المغناطيسية من خلال تنظيف محلول الشطف، ويتم إطلاق الحمض النووي الجينومي الممتز تحت تأثير محلول الشطف. هذه المجموعة مناسبة لمجموعة متنوعة من البكتيريا سالبة الجرام ومعظم البكتيريا إيجابية الجرام. يمكن استخدام الحمض النووي الجينومي عالي النقاء والنزاهة العالية الذي تم الحصول عليه مباشرة لتضخيم PCR اللاحق، والتهجين الجنوبي، وإعداد المكتبة وتجارب البيولوجيا الجزيئية الأخرى.
شروط التخزين والشحن
ينبغي شحن الليزوزيم والبروتين K وRNase A مع الثلج الرطب وتخزينها في درجة حرارة -20؛ يتم شحن الكواشف الأخرى وتخزينها في درجة حرارة الغرفة لمدة تصل إلى 12 شهرًا.
محتويات المنتج
|
رقم المكون |
عنصر |
G3603-50T |
|
G3603-1 |
الليزوزيم |
1 مل |
|
G3603-2 |
الليزوزيم العازلة |
7 مل |
|
G3603-3 |
المخزن المؤقت MB1 |
12 مل |
|
G3603-4 |
المخزن المؤقت MB2 |
12 مل |
|
G3603-5 |
بروتيناز ك |
1 مل |
|
G3603-6 |
رناسي أ |
500 ميكرولتر |
|
G3603-7 |
حبات سويماج |
1 مل |
|
G3603-8 |
المخزن المؤقت MBP |
12 مل (18 مل من الإيثانول اللامائي يضاف قبل الاستخدام) |
|
G3603-9 |
العازلة PW |
24 مل (56 مل من الإيثانول اللامائي يضاف قبل الاستخدام) |
|
G3603-10 |
العازلة TE |
10 مل |
|
يدوي |
نسخة واحدة |
|
قبل البدء (يرجى القراءة بعناية)
1. إذا كان هناك أي ترسيب من المخزن المؤقت MB1، يرجى إذابته عن طريق التسخين عند درجة 65 واستخدامه بعد عودته إلى درجة حرارة الغرفة.
2. أضف 18 مل من الإيثانول اللامائي إلى المخزن المؤقت MBP و56 مل من الإيثانول اللامائي إلى المخزن المؤقت PW قبل الاستخدام.
3. الحامل المغناطيسي مطلوب ولكن غير متوفر في هذه المجموعة.
بروتوكول / إجراءات الفحص
1. الطرد المركزي 1-5 مل من الثقافة البكتيرية الطازجة طوال الليل عند 12،000 دورة في الدقيقة لمدة دقيقة واحدة وتجاهل المادة الطافية.
ملحوظة: بالنسبة للبكتيريا موجبة الجرام، يجب إضافة محلول الليزوزيم لكسر جدار الخلية بعد جمع الكائنات الحية. الأسلوب المحدد هو كما يلي: إضافة 130 ميكرولتر ليسوزيم عازلة، 20 ميكرولتر ليسوزيم، دوامة ويهز حتى يتم تعليق البكتيريا تماما، حمام مائي عند 37 درجة لمدة 60 دقيقة، خلط كل 10 دقيقة مع الانقلاب.
2. أضف 200 ميكرولتر من المخزن المؤقت MB1 إلى أنبوب الطرد المركزي واخلطه عن طريق الدوامة.
3. أضف 20 ميكرولتر من بروتيناز K و10 ميكرولتر من RNase A إلى أنبوب الطرد المركزي، واخلط جيدًا عن طريق الأنابيب أو الدوامة، ثم احتضان عند 56 درجة لمدة 20 دقيقة، وفي ذلك الوقت يظهر المحلول واضحًا (إذا لم يكن الحل شفافًا عند هذه النقطة، قم بتمديد فترة الحضانة إلى 30 دقيقة، واخلط مرة واحدة كل 10 دقائق).
4. أضف 200 ميكرولتر من المخزن المؤقت MB2 و200 ميكرولتر من الإيثانول المطلق إلى أنبوب الطرد المركزي واخلطه رأسًا على عقب وأسفل، وعند هذه النقطة قد تظهر راسب ندف.
5. أضف 20 ميكرولتر من تعليق SweMag Beads إلى أنبوب الطرد المركزي (يجب إعادة تعليق خرز SweMag بالكامل وتوزيعه بالتساوي قبل الاستخدام)، انفخ باستخدام ماصة حتى يتم توزيع الخرز المغناطيسي بالتساوي.
6. تم السماح للخرز المغناطيسي بالوقوف في درجة حرارة الغرفة لمدة 10 دقائق، وأثناء العملية، تم نفخ الخرز المغناطيسي وخلطه عدة مرات باستخدام ماصة للحفاظ على الخرز المغناطيسي معلقًا.
7. ضع الأنبوب على حامل مغناطيسي واتركه لمدة 30 ثانية. عندما يكون المادة طافية واضحة، نضح وتجاهل المادة طافية.
8. أضف 500 ميكرولتر من المخزن المؤقت MBP، وأزل الحامل المغناطيسي، ثم قم بالماصة لأعلى ولأسفل بلطف حتى يتم تفريق الخرز المغناطيسي جيدًا. ضع الأنبوب على حامل مغناطيسي لمدة 30 ثانية. عندما يكون المادة طافية واضحة، نضح وتجاهل المادة طافية واضحة.
9. أضف 600 ميكرولتر من Buffer PW، وأزل الحامل المغناطيسي، ثم قم بالماصة لأعلى ولأسفل بلطف حتى يتم تفريق الخرز المغناطيسي جيدًا. ضع الأنبوب على حامل مغناطيسي لمدة 30 ثانية. عندما يكون المادة طافية واضحة، نضح وتجاهل المادة طافية واضحة.
10. كرر الخطوة 9.
11. افتح غطاء أنبوب الطرد المركزي، واتركه في درجة حرارة الغرفة لمدة 5-10 دقيقة لضمان التبخر الكامل للإيثانول المتبقي. (لا تسمح لهم بالجفاف لتجنب التأثير على إنتاجية الحمض النووي)
12. قم بإزالة الحامل المغناطيسي، وأضف 50-100 ميكرولتر من المخزن المؤقت TE أو الماء الخالي من النيوكلياز، ثم قم بالماصة لأعلى ولأسفل بلطف لإعادة تعليق الخرزات المغناطيسية، ثم قف في درجة حرارة الغرفة لمدة 5 دقائق.
13. ضع الأنبوب على حامل مغناطيسي حتى يتم امتصاص الخرز المغناطيسي بالكامل، ثم قم بسحب المادة الطافية إلى أنبوب طرد مركزي جديد خالٍ من النيوكلياز للحصول على الحمض النووي الجينومي عالي النقاء.
ملحوظة
1. تأكد من قراءة دليل المنتج هذا بعناية قبل التشغيل.
2. ينبغي استخدام الكائنات الحية الطازجة قدر الإمكان لضمان إنتاجية وسلامة الحمض النووي الجينومي الذي تم الحصول عليه عن طريق الاستخراج.
3. لا ينبغي أن تكون الكمية الأولية من العاثيات المستخرجة كبيرة جدًا ويجب أن يتم تحللها بشكل كافٍ، وإلا فقد يتأثر إنتاج ونقاء الحمض النووي الجينومي.
4. يجب تخزين معلقات الخرز المغناطيسي لتجنب التجمد.
5. من السهل تسوية الخرز المغناطيسي، ويجب رجه جيدًا قبل الاستخدام لإبقائه في حالة تعليق موحدة.
6. قبل إضافة الخرز المغناطيسي، يجب خلط الكواشف الأخرى جيدًا.
7. لا تجفف الخرز المغناطيسي لفترة طويلة لأن ذلك قد يؤثر على كفاءة شطف الحمض النووي.
للاستخدام البحثي فقط!
الوسم : مجموعة استخراج الحمض النووي الجينومي البكتيري magbind، الصين مجموعة استخراج الحمض النووي الجينومي البكتيري magbind المصنعين والموردين والمصنع
