FerroOrange طريقة الفلورسنت مجموعة أدوات الكشف عن خطوط الطول الحديدية

 

اسم المنتج	قطة.لا.	المواصفات.
FerroOrange طريقة الفلورسنت مجموعة الكشف عن خطوط الحديدوز	G1727-100T	100 T

 

 

FerroOrange، المعروف أيضًا باسم RhoNox-4، يكتشف على وجه التحديد أيونات الحديدوز (II) الحرة داخل الخلايا (Fe²⁺). المبدأ الأساسي للمجموعة هو أنه بعد تفاعل FerroOrange مع الأيونات الحديدية، يتم إنشاء منتج مضان برتقالي بشكل لا رجعة فيه، وتتناسب شدة التألق مع محتوى الأيونات الحديدية في الخلية. ولا أيونات الحديد (III) (Fe³⁺) ولا أيونات المعادن ثنائية التكافؤ بخلاف الحديد تزيد من شدة مضانها. FerroOrange ذو نفاذية عالية لغشاء الخلية ويمكن أن يبقى في الخلية بعد التفاعل السريع، لذلك فهو مناسب لتصوير الخلايا الحية.

استنادًا إلى مبادئ الكشف المذكورة أعلاه، تأخذ هذه المجموعة FerroOrange كجسم رئيسي، وتوفر عازلًا داعمًا خاصًا ومحفزًا إيجابيًا. يمكن استخدام المجهر الفلوري وأداة وضع العلامات الإنزيمية وغيرها من الأدوات المقابلة للكشف عن الأيونات الحديدية في الخلايا الحية، وهو مناسب للاستخدام وحساس للكشف.

 

 

السفينة مع الثلج الجاف. يخزن في درجة -80 بعيدا عن الضوء لمدة 6 أشهر.

 

 

رقم المكون	عنصر	G1724-100T
G1727-1	مسبار الفلورسنت FerroOrange	20 μL
G1727-2	المخزن المؤقت للكشف عن الأيونات الحديدية	20 مل
G1727-3	محفز إيجابي للأيونات الحديدية	2×1 مل
يدوي		1 جهاز كمبيوتر

ملحوظة:تتوافق أوقات رد فعل المجموعة المذكورة أعلاه مع 96-نظام فحص لوحة البئر.

 

 

1. التحضير قبل التجربة:يتم تلقيح الخلايا في 96-ألواح جيدة ومعالجتها مسبقًا وفقًا للغرض التجريبي؛

2. تكوينفيرو أورانجحل العمل: قم بإعداد حل عمل FerroOrange وفقًا للحاجة، ويمكن إحالة نظام التكوين إلى الجدول التالي، لاحظ أن خصائص الخلية المختلفة مختلفة، وفقًا للوضع الفعلي للتجربة، يمكن إضافة أو تقليل تركيز المسبار المستخدم، نسبة التخفيف الأولية الموصى بها هي 1:500؛ قبل التحضير، دوامة والطرد المركزي مسبار الفلورسنت FerroOrange لفترة وجيزة للتأكد من أن جميع الكواشف مغمورة في الجزء السفلي من الأنبوب؛

 

	المجموعة التجريبية	مجموعة التحكم
مسبار الفلورسنت FerroOrange	0.2 μL	0.2 μL
المخزن المؤقت للكشف عن الأيونات الحديدية	100 μL	90 μL
محفز إيجابي للأيونات الحديدية		10 μL

 

3. علامات تلطيخ(مع الخلايا الملتصقة كمثال؛ يتطلب علاج الخلايا المعلقة الطرد المركزي):

3.1. قم بإزالة وسط زراعة الخلية الأصلي واغسل الخلايا 1-2 مرات باستخدام برنامج تلفزيوني أو مخازن مؤقتة أخرى؛؛

3.2. قم بإزالة المخزن المؤقت للغسيل، وأضف 100 ميكرولتر من محلول العمل Fluo-4 AM إلى كل بئر، واحتضنه في حاضنة الخلية عند 37 درجة لمدة 30 دقيقة بعيدًا عن الضوء؛

3.3. قم بإزالة محلول العمل FerroOrange في نهاية الحضانة واغسل الخلايا 1-2 مرات باستخدام برنامج تلفزيوني أو مخازن مؤقتة أخرى؛

3.4. إضافة 100 ميكرولتر PBS أو محلول عازل آخر لتغطية الخلية الملتصقة، أو إعادة تعليق بيليه الخلية، للكشف عن التألق التالي؛

4. الكشف عن مضان: استخدم المجهر الفلوري وعلامة الإنزيم وغيرها من الأدوات للكشف عنه. FerroOrange هو فلوري برتقالي مع EX / EM ≈ 543/580 نانومتر. يجب أن تكون شدة التألق لمجموعة المراقبة الإيجابية المعالجة بالمحفز الإيجابي أضعف من المجموعة التجريبية.

 

 

1. نظرًا لاختلاف الخصائص بين الخلايا وطرق المعالجة المسبقة المختلفة، فإن نسبة استخدام المسبار ونطاق وقت الحضانة الموضح في الخطوات هي للإشارة فقط ويمكن تعديلها وفقًا لظروف محددة.

2. الأصباغ الفلورية لديها مشاكل في التبريد، يرجى الانتباه لتجنب عملية الضوء لإبطاء التبريد الفلوري.

3. FerroOrange حساس جدًا للرطوبة، لذا يرجى تعبئته بشكل صحيح وفقًا للترتيب التجريبي عند استخدامه لأول مرة.

4. يمكن لـ FerroOrange اكتشاف الحديد ثنائي التكافؤ الحر فقط ولا يمكنه اكتشاف الحديد المرتبط.

5. زيادة شدة التألق بعد تفاعل FerroOrange مع Fe²⁺لا رجعة فيه ولا يمكن استخدامه للمراقبة الديناميكية في الوقت الحقيقي لمستويات الأيونات الحديدية.

6. بناءً على مبدأ عمل هذا المسبار، ليس من الممكن معالجة الخلايا مثل التثبيت أو التثقيب.

7. بعض الرواسب بعد الذوبان هي ظاهرة طبيعية، ويتم رجها بالكامل قبل الاستخدام للتأكد من ذوبانها بالكامل.

8. من أجل صحتك وسلامتك، يرجى ارتداء معطف المختبر والقفازات أثناء العملية.

 

للاستخدام البحثي فقط!

 

 

الوسم : طريقة الفلورسنت الحديدية مجموعة أدوات الكشف عن الخطوط الحديدية، الصين مجموعة أدوات الكشف عن الخطوط الحديدية طريقة الفلورسنت الحديدية المصنعين والموردين والمصنع