مقدمة المنتج

اسم المنتج	قطة. لا.	المواصفات.
كوماسي بريليانت بلو G250	جي2039-250مل	250 مل

وصف المنتج/مقدمة

يمكن لـ Coomassie Brilliant Blue G250 ربط البروتينات بسرعة. الحد الأقصى لامتصاص Coomassie Brilliant Blue G250 هو 488 نانومتر في الحالة الحرة. بعد الارتباط بالبروتين، تغير الحد الأقصى للامتصاص إلى 595 نانومتر. تتناسب قيمة الامتصاص البصري مع محتوى البروتين، لذلك يمكن استخدامه للكشف الكمي عن البروتين. يمكن أيضًا استخدام هذا المنتج كمكمل لمجموعة الكشف الكمي للبروتين G2001 Bradford Assay.

شروط التخزين والشحن

يُشحن ويخزن في درجة حرارة الغرفة، صالح لمدة 12 شهرًا.

بروتوكول/إجراءات الفحص

1. (اختياري) رسم المنحنى القياسي (طريقة قارئ الصفيحة الدقيقة): حل جيش صرب البوسنة في الماء لإعداد 0.5 ملغ/مل محلول العمل القياسي للبروتين. تتم إضافة محلول العمل القياسي للبروتين إلى 96-لوحة البئر عند مستويات 0، 1، 2، 4، 8، 12، 16، 2 0 ميكرولتر، ثم عمل التدرج يتم استكمال المحلول إلى 20 ميكرولتر مع برنامج تلفزيوني أو محلول ملحي. منحنيات التدرج لتركيز البروتين هي 0، 25، 50، 100، 200، 300، 400 و 500 ميكروغرام / مل. إذا تم إجراء مقارنات كمية نسبية فقط، فلن تكون هناك حاجة إلى منحنيات قياسية.

2. تحضير العينة المراد اختبارها: يتم تخفيف عينة البروتين المراد اختبارها بشكل مناسب (يمكن الكشف عن تركيز البروتين في العينة عن طريق التجربة المسبقة ليكون ضمن نطاق المنحنى القياسي، لضمان موثوقية نتيجة الاختبار )، ويتم إضافة 20 ميكرولتر من كل عينة إلى لوحة البئر 96-. ينبغي تخفيف العينة المراد اختبارها في نفس الحل مثل معيار البروتين.

3. الكشف: تتم إضافة 200 ميكرولتر من محلول Coomassie الأزرق الرائع G250 إلى كل بئر ويتم خلطه جيدًا (يمكن وضع لوحة البئر 96- على المذبذب لمدة 30 ثانية). بعد 3-5 دقيقة عند درجة حرارة الغرفة، يتم استخدام المنحنى القياسي رقم 0 كمرجع، ويتم إجراء القياس اللوني عند طول موجة 595 نانومتر، ويتم تسجيل قيمة الامتصاصية لكل بئر.

4. الحساب: يتم أخذ محتوى البروتين المتدرج (ميكروجرام/مل) في المنحنى القياسي باعتباره الإحداثي الإحداثي، ويتم أخذ قيمة امتصاص الضوء كالإحداثي لرسم المنحنى القياسي. وفقًا لقيمة الامتصاصية للعينة، يمكن العثور على تركيز البروتين للعينة المراد قياسها في البئر المقابل على المنحنى القياسي (ميكروجرام/مل)، ثم ضربه بتخفيف العينة، وتركيز البروتين الفعلي لـ العينة المراد قياسها.

5. بالإضافة إلى ذلك: إذا تم استخدام مقياس الطيف الضوئي لتحديد، يتم استخدام أنبوب اختبار الزجاج أو أنبوب قياس الألوان الزجاجي كوعاء التفاعل لعمل منحنيات قياسية. بعد التخفيف المناسب لعينة البروتين المراد اختبارها، قم بإضافتها إلى أنبوب اختبار زجاجي جديد أو أنبوب قياس لوني بحجم عينة يبلغ 1 مل. أضف 3 مل من محلول Coomassie الرائع G250 الأزرق إلى أنبوب التدرج القياسي وأنبوب العينة، واخلطه جيدًا، ثم قف في درجة حرارة الغرفة لمدة 3-5 دقيقة، ثم استخدم مقياس الطيف الضوئي للكشف اللوني.

6. الكشف: يتم ضبط الطول الموجي لمقياس الطيف الضوئي على 595 نانومتر، ويتم صفر المنحنى القياسي والعينة المراد اختبارها مع أنبوب المنحنى القياسي رقم 0 كمرجع. يتم رسم المنحنيات القياسية كما هو موضح في الخطوة 4 ويتم حساب تركيزات البروتين في العينات المراد اختبارها.